Was ist die Korrelation zwischen Korrigierte Optische Dichte und Zellzahl
? Optische Dichte - ein Maß für das Ausmaß, in dem ein Stoff sendet Licht - wird oft verwendet , um die Konzentration von Zellen oder Partikel dispergiert sind, zu messen, aber nicht aufgelöst , in ein Fluid ist. Die korrigierte optische Dichte dieser Art der Mischung als Suspension bekannt ist, ist direkt proportional zu der Konzentration , die Dichte oder die Anzahl der Zellen darin dispergiert. Bier-Lambert Gesetz
Lambert-Beer- Gesetz, das besagt, dass die Absorption ist proportional oder eine lineare Beziehung , die Konzentration der absorbierenden Spezies , gilt nur für optische Dichten unter 0,4 . Jedoch können Proben mit optischen Dichten, die höher als 0,4 durch eine definierte Verdünnungsfaktor und ihre optischen Dichten gemessen, verdünnt werden. Wenn die Messwerte mit dem Verdünnungsfaktor , um die korrigierte optische Dichte erzeugen unterteilt ist dieser neue Wert proportional zu der Anzahl der Zellen in der Probe.
Spektralphotometer
die optische Dichte wird mit einem Instrument , wie einem Spektrophotometer bekannt , die die Helligkeit von Licht aus zwei Quellen , von denen eine bestimmte Standardeigenschaften aufweist emittiert vergleicht gemessen. Wenn Licht durch eine Zellsuspension, strömt, wird das Licht von den Zellen gestreut wird, so dass weniger davon erreicht eine Photozelle - eine elektronische Vorrichtung , deren elektrische Ausgangs variiert je nach der Stärke des Lichts, das auf sie - innerhalb des Spektrophotometers . So, desto höher die Anzahl der Zellen in der Suspension desto schwächer wird die elektrische Leistung von der Fotozelle und umgekehrt.
Optische Dichte Korrektur
optischen Dichten über 0,4 , ist der Grad , zu dem Zellen von anderen Zellen beschattet oder reflektieren das Licht oft werden spürbar. Bei höheren optischen Dichten , die nicht korrigierte optische Dichte der Zellsuspension nicht mehr direkt proportional zur Zellzahl . Jedoch ist die unkorrigierte optische Dichte verdünnten Zellsuspensionen fast proportional zu ihren relativen Dichten genau bekannt ist - das Verhältnis der Dichten der einer Referenzsubstanz , wie Wasser - , so ist es eine vernünftige Hypothese zugrunde, dass die unkorrigierte optische Dichte einer hoch verdünnten Zellsuspension ist in der Tat, seine wahre optische Dichte .
Relative optische Dichte
durch Multiplikation der relativen Dichte Wert einer Zellsuspension durch die Grund Wert der optischen Dichte des hoch verdünnten Zellsuspension erhalten wird, ist es möglich, die korrigierte optische Dichte zu erhalten . Allerdings ist die Messung so genau wie möglich zu machen, die grundlegende optische Dichte -Wert sollte aus mehreren Spektralphotometer Lesungen gewonnen werden.