Wie Buffer Stellen mit einem pH- Meter

Chemie und Biochemie Verfahren Scharnier häufig auf Reaktionen bei einem bestimmten pH durchgeführt. Solche Reaktionen profitieren von der Verwendung einer Pufferlösung , die eine Verbindung durch ihre Resistenz gegenüber pH-Veränderungen quantifiziert werden , wenn entweder starke Säuren oder Basen hinzugefügt ist . Die Durchführung dieser Verfahren erfordert ein Verständnis der Mischpufferlösungensowie die Kalibrierung und pH-Wert mit meters.Things Sie
Pufferlösung Salze Brauchen
1 -Liter-Becher
1 Liter destilliertes wasser und Rühren Platte
Rührstäbchen
pH-Meter pH-Meter
Kalibrierungslösungen
100 ml-Becherglas
Mikropipette
Mikropipette Spitze
Salzsäure ( HCl )
Natriumhydroxid ( NaOH)

Mehr zeigen Anleitung
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Wählen Pufferlösung Salze mit den richtigen pH- Grenze für die Reaktion. Einzelne Proteine ​​und Reaktionen bestimmten pH -Anforderungen. Die Anforderungen sind explizit in der Reaktions Protokoll angegeben, in die das Protein /Probe Begleitdokumentation präsentiert oder in einer Referenzmengenals Handbook of Chemistry and Physics aufgezeichnet. Eine optimale pH -Pufferlösung sollte so nah wie möglich an pH-Einheit der Reaktion fallen und sollte nie plus oder minus 1 pH-Wert überschreiten. Pufferlösung Salze sind als Paket erhältlich oder können aus rohen folgenden Komponenten weit verbreitet Rezepte gemischt werden.
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Gießen Sie die Pufferlösung in einen 1 - Liter-Becher . 1 Liter destilliertem Wasser . Setzen Sie ein Rührstab in den Becher und das Becherglas auf ein Rühren Platte . Aktivieren Sie die Platte unter Rühren bei niedriger bis mittlerer Stufe . Rühren, bis keine Pufferlösung Kristalle sichtbar bleiben.
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Zeigen 100 ml Becher im Test Nadel des pH-Meter ist . Reinigen Sie die Nadel durch Besprühen mit destilliertem Wasser . Das Becherglas wird die Lauf fangen ab. Kalibrieren Sie den pH-Meter unter Verwendung der Kalibrierungslösungen . Reinigen Sie die Nadel wieder . Entsorgen Sie die Inhalte Abfluss in der 100- ml-Becherglas eingefangen.
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Bringen Sie das pH-Meter auf der Rühr- Platte und 1- Liter-Becher . Einführung der Nadel in das Testpufferlösung. Drücken Sie Taste Berechnung des pH-Messgerät zur pH-Wert der Lösung bestimmen. Wenn dieser Wert zu hoch oder zu niedrig ist, die Lösung erfordert die folgenden zusätzlichen Schritte .
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Legen Sie eine frische Mikropipettenspitze auf der Mikropipette . Aktivieren Sie die Platte unter Rühren bei niedriger Geschwindigkeit . Wenn der pH zu hoch ist, die Mikropipette zu verwenden , um einen Tropfen in einer Zeit von Salzsäure zu der Lösung hinzuzufügen. Lassen Sie das Rühren Platte , um die Lösung zu mischen und den pH-Wert messen . Wiederholen Sie den Vorgang, bis der pH der Lösung ist die notwendige Wert . Wenn der pH-Wert zu niedrig ist, mit Natronlauge anstelle von Salzsäure diesen Schritt wiederholen.