Wie Reduzieren nicht-spezifischer Bindung zu Behälter

in einem Immunoassay die Bindungskapazität in einem Behälter oder in Mikrotitervertiefungen höher ist als die Proteinmenge in den Behälter oder Vertiefungen gegeben . Zu verringern oder Antikörper oder andere Arten von Proteinen und Molekülen absorbiert , um den Behälter oder die Vertiefungen zu verhindern, muss der Test mit dem geeigneten Puffer und eine spezifische Blockierungsmittel gewaschen werden muss hinzugefügt werden . Die Art der Puffer und der gewählten Blockierungsmittel hängt von der Art der experimentellen assay.Things Sie
Platte Brunnen Brauchen
Pufferlösung
Blocking Reagenz
Pipette
Antigen Antikörper

anzeigen MoreInstructions
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Coat die Platten Vertiefungen mit dem Antigen . Verwenden Sie ein Antigen Verdünnung. Reine Lösungen von Antigen sind , da nur etwa 3 Prozent des Proteins in der Probe das Zielprotein nicht erforderlich. Beim Verdünnen sicherzustellen, dass die Proben enthalten , die das Antigen in einer Konzentration , die im Erfassungsbereich des Antikörpers ist . Pipettieren Sie die Antigen -Verdünnungslösung auf den Plattenvertiefungen . Einige Platten mit Antigen vorbeschichtet werden . Lesen Sie die mit den Platten Brunnen versorgt Anweisungen.
2

Decken Sie die Platten mit einem Klebstoff Kunststoff und Inkubation über Nacht . Mit Pufferlösungen , wie beispielsweise Tris- gepufferter Kochsalzlösung oder Phosphat - gepufferte Kochsalzlösung , waschen. Zum Waschen , spülen Sie die Platten mit einem Squeeze- Flasche mit der Pufferlösung über eine Laborspülegefüllt. Pat die Platten mit einem Papiertuch , um alle verbleibenden Tropfen Pufferlösung zu entfernen.
3

Reduzieren der unspezifischen Bindung von Proteinen und Molekülen mit einem Blockierungspuffer oder Reagenz, wie einem Detergens blocker, Trockenmilch oder Rinderserum . Die Art der verwendeten Blockierungsmittel auf dem Assay abhängen. Fügen Sie den Blockierungsmittel in die Vertiefungen mit einer Pipette . Die Platte wieder mit Klebstoff Kunststoff und Inkubation über Nacht .
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Re - Brunnen waschen die Platte erneut mit einer Pufferlösung . Diese Schritte werden die Menge der nicht-spezifischen Bindung , die auf die Plattenvertiefungen auftreten können, vor der Zugabe der erforderlichen Antikörperlösung für das Verfahren zu verringern. Darüber hinaus kann die Sperr Reagenzien zu reduzieren Hintergrundfarben in den Ergebnissen der Tests .