How to Tell Wenn ein Aptamer hat seine Ziel gefunden

Aptamere sind relativ kurze Ketten von Nukleotiden, geschaffen, um zu einem bestimmten Ziel zu binden . Die Nukleotide sind die gleichen Komponenten, aus DNA-oder RNA-Moleküle zu machen, und wenn sie in die richtige Konfiguration gebracht sind hoch spezifisch und haben eine hohe Affinität für ihre Ziele . Die hohe Spezifität bedeutet das Aptamer bindet nur an die Ziel es für entworfen und mit hoher Affinität bedeutet das Aptamer bindet sehr leicht zu seinem Ziel .
Aber das sind nur winzige Moleküle , und Sie können nicht nur nehmen Sie einen Blick und sehen, dass sie abgestimmt mit ihren Zielen. Glücklicherweise gibt es Möglichkeiten, um die Aptamer bekommen, um Bericht zu erstatten. Es gibt zwei verschiedene Konfigurationen , eines, in dem das Aptamer bindet, sein Ziel innerhalb oder an nur einem externen Bindungsstelle und die andere in dem das Target bindet an zwei sites.Things Sie
Aptamer Synthese Ausrüstung benötigen
Gold- Elektroden und Nanopartikel
Zielmoleküle in geeigneten Pufferlösungen
Amperemeter
Weitere Anweisungen
Einzel anzeigen Binding
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Bringen Sie ein Ferrocen -Komplex mit einem Ende der das Aptamer . Ferrocen ist eine metallorganische Verbindung , die gute Elektronentransfer- Eigenschaften hat.
2

Erstellen Sie das Aptamer mit einer Thiolgruppe um das andere Ende zu beenden. Die Thiolgruppe eine Schwefel -Wasserstoff- Anordnung, die eine starke Affinität zu Gold hat .
3

Konstruieren Sie eine Goldelektrode und ermöglichen die Aptamere , an die Oberfläche zu befestigen.

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die Elektrode in die Lösung von Interesse Tauchen , und die aktuelle überwachen. Wenn das Aptamer bindet ihr Ziel , wird es seine Konfiguration zu ändern und seinen beiden Enden nahe beieinander . Dies bringt die Ferrocen in der Nähe der Goldelektrode , die die aktuelle erhöht , so dass die Überwachung der Strom kann Ihnen sagen, wie viele der Aptamere haben ihre Ziele gefunden.
Doppelsitebindung
5 Farbwechsel ist ein Verfahren zur Überprüfung Aptamer verbindlich.

ein Ende des Aptamers an einer festen Oberfläche zu immobilisieren.
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Einführung des Zielmoleküls in die Lösung rund um die Aptamere auf der festen Oberfläche .
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Konstruieren Sie einen anderen spezifischen Aptamer an die gleiche Zielmolekül, und fügen Sie eine Gold-Nanopartikel auf der anderen Seite.
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waschen Sie die Lösung , dann ist die Einführung einer Nanopartikel- Wachstumslösung . Die Lösung wird zusätzliche Wachstums Gold auf den Nanopartikeln Samen abzuscheiden und eine sichtbare Farbänderung in dem das Zielmolekül vorhanden ist. Sie können nur an der Oberfläche und sehen den Unterschied in der Farbe, bei der das Aptamer hat sein Ziel gefunden.