Was ist ein Block Gehalt
? Assays , wie ELISA und Western Blot, verwenden Proteinmoleküle an der Oberfläche von anderen Proteinen oder Molekülen binden. Die Wechselwirkung oder die Fähigkeit dieser Assays Bindung von Proteinen führen ist wesentlich für die Prozedur ; es ist jedoch die nicht- spezifische Bindung von unerwünschten Proteinen während des Tests , die nachteilige Auswirkungen auf die Testergebnisse verursachen kann. Um die nicht- spezifische Bindung zu verhindern, können Blockierungsreagenzien zu dem Assay zugesetzt werden. Es gibt verschiedene Arten von Blockierungstests , die verwendet werden können , je nach Experiment . Waschmittel Blocker
Waschmittel sind eine Art von Blockierungsmittel , das sowohl ionische als auch nicht- ionisch sind . Diese Art von Blockierungsmittel in einem Assay müssen alle Lösungen , einschließlich Puffern vorhanden sein. Die Waschmittel Blocker können während des Assay-Verfahrens durch Waschen mit Wasser und Puffer entfernt werden. Diese Arten von Blocker werden häufig in Verbindung mit Protein -Blocker verwendet und sind preiswert und stabil zu lagern.
Protein -Blocker
Protein -Blocker blockieren alle nicht besetzten Stellen von der Oberfläche von Molekülen und stabilisieren Moleküle an die Oberfläche gebunden. Dies hilft Denaturierung von Proteinen während des Assayverfahrens zu verringern. Darüber hinaus sind Proteinblockerdauerhaft und müssen während des Verfahrens noch einmal aufgenommen werden und wird nicht mit Wasser abwaschen oder Pufferlösung nur . Die häufigsten Protein -Blocker sind Rinderserumalbumin, fettfreie Trockenmilch , normale Serum-und Fischgelatine .
Polymer -Blocker
Polymere , wie Polyethylenglykol (PEG ), Polyvinylalkohol (PVA) und Polyvinylpyrrolidon werden Blockierungsmittel für hydrophobe (wasser Abneigung )-Moleküle verwendet . Es macht die Oberflächen dieser Moleküle nicht verbindliche und hydrophilen (Wasser - Geschmack ) . Ein beliebter Test mit dieser Art von Block ist der over-the -counter Schwangerschaftstest.
Fisch Protein Blocks
Spezielle Fischproteinbausteine für die Immunoassays , wie ELISA, Ergebnisse zu verbessern , indem nicht-spezifische Bindung von Molekülen. Darüber hinaus kommen in verschiedenen Stärken meisten dieser Arten von Blöcken , um entweder Nachweis spezifischer Antigene ( Fremdkörper ) oder Mantel nicht- spezifische Bindungsstellen , die unzugänglich für andere Arten von Blockierungsreagenzien sind .