So identifizieren Gram Positive Rods

Seit den 1880er Jahren bleibt die Gram-Färbung Test eine wichtige Methode zur Identifizierung von Bakterien und Klassifizierung. Mikrobiologen führen oft die Gram-Test als erster Schritt bei der Identifizierung von bestimmten Arten von stabförmigen Bakterien von der Gattung Bacillus . Gram-Färbung ist für seine Erfinder , der dänischen Bakteriologen Hans Christian Gram benannt. Das Verfahren arbeitet wegen einer Differenz in gram-positiven und gram-negativen Bakterienzellwand Physiologie. Bestimmte gram positive Stäbchen zu schweren Krankheiten wie Milzbrand und tetanus.Things Sie
Lab Kleidung
Handschuhe Brauchen
Schuhbeläge
Kochtopf
Bakterien Kolonie
Agar
Petri Gerichte
Wasser
Impföse
Glasschiebe
Methanol
Bunsenbrenner
Kristallviolett -Färbung
Jod Fleck Reagenz
Decolorizer
Safranin
Fuchsin -Lösung
Absorbent Papier
Mikroskop
Weitere Anweisungen anzeigen
1

Sichern Sie den Einsatz von einem sauberen, keimfreien Laborflächen , die Gram-Färbung Test durchzuführen . Tragen Sie saubere Labor Bekleidungs-und Schuhabdeckungen, um eine Kontamination zu verhindern. Verwenden Sie Handschuhe und eine Maske beim Umgang mit Bakterienkulturen . Isolieren einer Kolonie von Bazillen für Ihren Test und es wachsen auf nährstoffreichen Agar in Petrischalen . Sterilisieren Sie die Petrischalen und Agar mit einem Schnellkochtopf , bevor Sie.
2

Fügen Sie ein paar Tropfen sauberes Wasser in die Kulturschale . Verteilen Sie es gleichmäßig auf dem Agar . Ziehen Sie eine Impföse leicht über der Agar- Oberfläche . Übertragen Sie die Probe auf einen sauberen Glasobjektträger und schmieren sie gleichmäßig in kreisförmigen Fläche von der Größe eines Cent. Halten Sie die Größe der Stichprobe minimal; sollten Sie kaum in der Lage , es mit dem bloßen Auge zu sehen.
3

Nehmen 95 Prozent Methanol über den Objektträger -Abstrich für zwei Minuten , um die Zellen zu fixieren und zu verhindern, Verzerrung ihrer Morphologie . Luft trocknen Sie die Folie oder erhitzen Sie es vorsichtig über eine niedrige Bunsenbrenner-Flamme . Bewegen Sie den Schiebe hin-und her, um gleichmäßig zu erwärmen und vermeiden lokalisierte Hot Spots. Übernehmen Sie die Wärme gleichmäßig und konsequent . Vermeiden Sie die Folie aus der Flamme , bis Sie Erhitzen fertig sind.
4

Gießen Kristallviolett -Färbung Reagenz über die feste Folie. Lassen Sie es für 30 bis 60 Sekunden stehen . Waschen Sie den Fleck mit Leitungswasser für ein paar Sekunden. Überschüssiges Wasser aus der Folie. Abdeckung die Folie mit Jod -Färbung Reagenz für 30 bis 60 Sekunden. Waschen Sie die Jod mit Leitungswasser . Neigen Sie den Schieber , und fügen Sie ein paar Tropfen Entfärber . Wenden Sie es , bis der Abfluss sauber ist. Die Folie waschen.
5

Genießen Sie die Folie mit rosafarbenen Safranin Gegenfärbung Reagenz für 30 Sekunden. Sie können Basisfuchsinlösung Lösung für die Safranin ersetzen. Waschen Sie vorsichtig die Folie und Shake von überschüssigem Wasser . , Trockentupfen mit saugfähigem Papier und dann an der Luft trocknen die Folie. Untersuchen Sie die vorbereitete Objektträger unter dem Mikroskop mit einer Lichtquelle ausgestattet. Suchen und identifizieren gram-positive Bakterien Stangen mit blauen oder violetten Färbung der Gram-Färbung Test.