Wie Peroxidase Stains Führen
Nachweis von Antikörpern ist wichtig sowohl für die Forschung im Labor und Klinische Diagnostik. Normalerweise sind Antikörper unsichtbar. Wenn Sie Antikörpern in einem Stück Gewebe erkennen wollen , müssen Sie einen anderen als nur der Blick durch ein Mikroskop -Strategie zu verwenden . Alkalische Phosphatase -Färbung und Peroxidase-Färbung sind zwei solche Verfahren . In Peroxidase-Färbung , das Enzym Peroxidase, die in den Antikörper befindet, wird verwendet, um eine chemische Reaktion zu katalysieren , was zu einem farbigen membrane.Things Sie
Naphtholderivat benötigen (10 ml )
Benzidin - Derivat Lösung (1 Flasche )
H3PO4 - Zitronensäure -Pufferlösung ( 200 ml)
Wasserstoffperoxid ( 1 Flasche )
Messzylinder
Mikropipette
Phosphat - gepufferte Kochsalzlösung oder Tris - gepufferte Kochsalzlösung
Kunststoff-Fach
Weitere Anweisungen
1
mischen Sie die 10 ml Naphtholderivat und der Flasche Benzidin - Derivat Lösung, um eine Färbung Stammlösung machen anzeigen .
2
Mix zusammen die 200 ml H3PO4 - Zitronensäure -Pufferlösung und der Flasche von Wasserstoffperoxid.
3
Zeigen 50 ml der Pufferlösung in ein 50 bis 100 mL Messzylinder .
4
2,5 ml der Stammlösung hinzufügen Färbung mit der Mikropipette und mischen.
5
Legen Sie diese Farblösung in einer Plastikschale .
6
waschen der Membran mit Kochsalzlösung (Phosphat - gepufferte Salzlösung oder Tris - gepufferte Kochsalzlösung) und tauchen in der Färbelösung . Lassen Sie es für 10 Minuten und 1 Stunde einweichen.
7
Als die Band sichtbar wird , entfernen Sie die Membran und spülen Sie ihn unter fließendem Wasser für 10 Minuten, um die Reaktion zu stoppen.