Was passiert mit der Größe von DNA-Fragmenten , wie Sie bewegen sich von der Kathode zur Anode Ende des Gels
? Agarose -Gelelektrophorese ist eine Methode verwendet, um DNA sowie separate DNA-Fragmente nach ihrer Größe zu visualisieren. Elektrophorese nutzt ein elektrisches Feld , um elektrisch geladene Moleküle zu trennen. Desoxyribonukleinsäure oder DNA trägt eine negative Nettoladung ; Dies macht es möglich, die Moleküle zeichnen elektrophoretisch auf eine positiv geladene Pol . Agarose-Gel dient als Medium, durch das die DNA-Moleküle wandern, wenn sie durch Elektrophorese getrennt . Laden der Gel
Agarose -Gelelektrophorese trennt DNA-Moleküle auf der Basis der Größe der in der Probe enthaltenen Fragmente . Kleine Löcher an der Oberseite des Gels , als " Wells " mit der Flüssigkeit , die die DNA untersucht werden geladen. Das Ende des Gels wird an der Anode platziert , oder negativ geladene elektrische Quelle .
Kleine Fragmente
DNA-Fragmente werden in Richtung der Kathode gezogen , oder positiv geladene elektrische Quelle . Da die Moleküle wandern durch das Agarosegel , beginnen sie, je nach Größe zu trennen. Die kleinsten DNA-Fragmente sind diejenigen der niedrigsten Molekulargewicht ; Diese Fragmente sind der schnellste in Richtung der Kathode Ende des Gels wandern .
größere Fragmente
Als DNA-Fragmente größer und haben eine höhere Molekulargewichte , sie sind langsamer , um durch die Agarose-Gel zur Kathode zu bewegen; daher sind die größte DNA-Fragmente in der Nähe der Anode Ende des Gels gefunden, während die kleinsten Fragmente der DNA sind in der Nähe der Kathode Ende gefunden.
Visualisierung
DNA Fragmente können unter einer UV-Lichtquelle durch Anfärbung mit einer speziellen chemischen Substanz Ethidiumbromid sichtbar gemacht werden. Wann UV ausgesetzt Licht, fragmentierte DNA wird in einer Leiterbildung am unteren Ende der Leiter zu erscheinen, mit den schwersten und größten DNA-Fragmente an der Spitze der Leiter und der leichtesten , kleinsten DNA-Fragmente .